Metoda proizvodnje oksitocina

Mar 16, 2026

Pustite sporočilo

Ekstrakcija oksitocina: Vzemite 100 g posušenega prahu *Pterocarya stenoptera* in 30 g kremenčevega prahu, postavite ju v kroglični mlin, dodajte destilirano vodo in štirikrat ekstrahirajte po isti metodi. Količina dodane destilirane vode je 1,4 L dvakrat in 1,3 L dvakrat. Vsaka ekstrakcija traja 45 minut, sledi centrifugiranje. Zberite tekočino in znova ekstrahirajte ostanek. Združite štiri izvlečke, da dobite raztopino oksitocina. To je: posušen prah *Pterocarya stenoptera* [voda, kroglični mlin] → izvleček oksitocina (kromatografsko ločevanje).

 

Dodajte 1500 g predhodno obdelanega sintetičnega zeolita v 20 L 0,25 % raztopine ocetne kisline, premešajte in prelijte v izmenjevalno kolono. Ko raztopina ocetne kisline pade na 2-3 cm nad površino zeolita, dodajte ekstrakt. Zberite belo motno tekočino (v glavnem vsebuje oksitocin zaradi svojega pI 7,7, medtem ko ima vazopresin pI 10,9, zaradi česar se zlahka adsorbira kot pozitivni ion) z ustrezno hitrostjo pretoka. Ko nivo ekstrakta pade na površino zeolita, takoj dodajte destilirano vodo in nadaljujte z zbiranjem motne tekočine, dokler ne izteče vsa tekočina. Motno raztopino naravnamo na pH 3,5 z ledocetno kislino, hitro segrejemo na 95 stopinj v vodni kopeli in držimo 3 minute, nato hitro ohladimo in pustimo v hladilniku čez noč. Postopek je bil: ekstrakt oksitocina [HAc, kolona sintetičnega zeolita] → motna raztopina [HAc, segreta] → raztopina za ločevanje (adsorpcija, elucija). Naslednji dan smo ohlajeno raztopino filtrirali in filtratu med mešanjem dodali 10 % bentonitno brozgo (3 mL na 100 mL). Adsorpcijo smo izvajali 1 uro, čemur je sledilo centrifugiranje. Supernatant smo preverili s testno raztopino sulfosalicilne kisline; brez padavin je kazalo na popolno adsorpcijo. Če je prišlo do nepopolne adsorpcije, smo adsorpcijo ponovili in obe oborini bentonitne brozge združili. Bentonit smo štirikrat eluirali z 1 % ocetno kislino (1,6 l, 1,4 l, 1,2 l oziroma 0,8 l). Vsako eluent smo segreli na 80 stopinj, dodali klorobutanol in temperaturo nadalje zvišali na 95 stopinj, nato pa hitro ohladili na 25 stopinj. Eluente smo filtrirali ali centrifugirali in štiri filtrate združili, da smo določili jakost in mejo vazopresina. To je priprava ohlajene tekočine [filtracija] → filtrat [milna glinena gošča] → adsorbent [1 % HAc] → eluent injiciranje oksitocina.

Pošlji povpraševanje