Retatrutidne nečistoče

Retatrutidne nečistoče|Referenca nečistoč ritaglutida|Sinteza nečistoč po meri in preverjanje strukture|Znanstveni-peptid

Ritaglutid nadzoruje nečistoče - za razvoj analitične metode, študije kakovosti, predložitev generičnih zdravil Science-Peptide zagotavlja sintezo nečistoč, povezanih z ritaglutidom, po meri, vključno z manjkajočimi peptidi, oksidiranimi nečistočami, maščobnimi kislinami, dimeri itd., s strukturnimi potrditvenimi podatki za podporo vašim študijam profiliranja nečistoč. Vabljeni, da nas kontaktirate. Vabljeni, da nas kontaktirate.

Retatrutide nečistoče (Retatrutide) je bil v zadnjih dveh letih v ognju triagonist GLP-1/GIP/glukagon, njegov učinek na hujšanje pa je še močnejši od učinka simeoglutida. Domači peptidni generiki strmijo, patent je tik pred iztekom, kdor prvi zgrabi prvega generika, ta bo lahko pojedel velik kos trga.

 

Kakovostne raziskave pa so bistvenega pomena za izdelavo generičnih zdravil. Analiza spektra nečistoč, produkti za nadzor nečistoč, validacija metode, nič od tega ne sme manjkati v informacijah o vložitvi. Retarotid je velik peptid z 39 aminokislinami in dvema stranskima verigama maščobnih kislin. Sintezni proces lahko proizvede več nečistoč kot običajni peptidi - manjkajoči peptidi, oksidirane nečistoče, dimeri, produkti izločanja maščobnih kislin, od katerih je treba vsakega razjasniti.

 

Pri Science-Peptide smo si nabrali veliko izkušenj pri sintetiziranju kompleksnih peptidnih nečistoč. Imamo nabor postopkov priprave nečistoč posebej za dolgoverižne modificirane peptide, kot je ritaglutid. Sintezo različnih kontrol nečistoč ritaglutida lahko prilagodimo vašim potrebam, s strukturnimi potrditvenimi podatki in vam pomagamo vzpostaviti metodo, tako da boste imeli jasno predstavo ob vložitvi.

Ritaglutid je velika molekula, proces sinteze je kompleksen, kompleksen je tudi vir nečistoč. Ko izvajamo študije nečistoč, se osredotočamo predvsem na te kategorije:

Manjkajoči peptid
Ne-spajanje ene ali več aminokislin med sintezo je najpogostejša nečistoča v procesu. Različni položaji manjkajočega peptida imajo različno polarnost in jih je treba lokalizirati na HPLC. Na primer, če manjka lizin na položaju 15 ali če manjka aminokislina na koncu verige maščobnih kislin, je retenzijski čas precej drugačen, vendar brez kontrole ne veste, kdo je vrh.

Oksidativne nečistoče
Met zlahka oksidira v sulfoksid, kar spremeni njegovo polarnost in vpliva na test čistosti. Ker je Met prisoten v zaporedju retarotida, je oksidirana nečistota bistvena kontrolna postavka. Včasih se oksidirani vrhovi pojavijo po določenem času, zato moramo biti pozorni na to.

Dimeri/polimeri
Med sintezo ali shranjevanjem se dve ali več molekul združi z disulfidnimi vezmi ali ne-kovalentnimi interakcijami in so ključne nečistoče v snovi. Podvojitev molekulske mase dimera je pogosto velik vrh pri HPLC in ga je treba nadzorovati.

Izdelki za izločanje maščobnih kislin
Retarotid nosi dve stranski verigi maščobnih kislin (npr. oktadekandiojsko kislino) in ta modifikacija se lahko delno odstrani med sintezo ali shranjevanjem, zaradi česar maščobna kislina-odstranjuje nečistoče. Struktura te vrste nečistoč je tako drugačna od glavnega vrha, da je za njeno lociranje potrebna posebna kontrola. Naleteli smo na stranko, ki je delala študije stabilnosti, po enem mesecu shranjevanja se je pojavil vrh, nato pa smo ugotovili, da je maščobna kislina padla s polovice vrha.

Deamidirane nečistoče
Asparagin (Asn) in glutamin (Gln) se zlahka deamidirata v kislih ali segretih pogojih, da nastanejo izomeri. Te nečistoče pogosto najdemo pri testih prisilne razgradnje in jih je treba nadzorovati.

Diastereoizomeri
Med dolgo-verižno sintezo so lahko posamezne aminokisline podvržene racemizaciji, kar ima za posledico diastereoizomere, ki jih je treba zaznati s kiralno kromatografijo ali posebnimi metodami. Čeprav vsebina običajno ni visoka, se bodo strokovnjaki o njej vprašali, ko bo razglašena.

Mnoge od teh nečistoč niso na voljo na trgu in jih je treba sintetizirati po meri. Izvedli smo veliko projektov za prilagajanje nečistoč ritaglutida in pokrili smo zgornje kategorije.

Izbris peptidne serije
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 15 is missing, or the amino acid at the end of the fatty acid chain is missing. We can synthesize them according to your impurity profile, and the purity is usually >95 % z MS. Stranka nas je prosila, naj sintetiziramo niz 12 manjkajočih peptidov od N-terminala do C-terminala, in naredili smo jih vse.

Oksidativne nečistoče
Met in Retarotide is oxidized to sulfoxide, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the control product in oxidized state. The purity of the product is >95 % in lahko zagotovimo MS spekter za potrditev stopnje oksidacije. Oksidacija je postopen proces in lahko dosežemo prevlado sulfoksida z nekaj stranskimi-produkti.

Dimer
Dimere, ki nastanejo z navzkrižnim -povezovanjem ali ne-kovalentno interakcijo, je mogoče pripraviti z različnimi metodami ter jih izolirati in prečistiti, da se zagotovijo kontrole visoke čistosti. Molekulska masa dimera je dvakrat večja od glavnega vrha, ki ga pozna MS. Nekatere stranke so zahtevale dimer za validacijo metode in dali smo jim 98-odstotno čistost.

Izdelki za izločanje maščobnih kislin
To je nečistoča, značilna za Retarutin. Verige maščobnih kislin so lahko delno pretrgane ali popolnoma ločene, kar povzroči vrsto sorodnih nečistoč. Sintetiziramo lahko različne različice z manjkajočimi ali okrnjenimi maščobnimi kislinami, da vam pomagamo natančno določiti lokacijo teh nečistoč. Najbolj zapleten primer, ki smo ga kdaj izvedli, je bil, ko nas je stranka prosila, naj sintetiziramo različico verige maščobne kisline s šestimi manjkajočimi ogljikovimi atomi, in to smo tudi storili.

Deamidirane nečistoče
Za mesta Asn in Gln v zaporedju lahko pripravimo deamidirane kontrole nečistoč s prisilno razgradnjo ali ciljno sintezo. Razlika v molekulski masi po deamidaciji je samo 1, zato jih z MS ni enostavno ločiti, zato je treba uporabiti posebne kromatografske pogoje, ki jih lahko uskladimo.

Druge nečistoče po meri
Če v svoji raziskavi najdete novo neznano nečistočo, vam lahko pomagamo analizirati strukturo in jo sintetizirati. Pošljite nam vzorec, izvedli bomo analizo LC-MS, špekulirali o strukturi, nato usmerjeno sintezo in nato primerjali retencijski čas in masni spekter, da potrdimo dogovor. Ta postopek smo izvedli že večkrat in stopnja uspešnosti je precej visoka.

Razvoj in validacija analitične metode
Pri nastavljanju metode HPLC ali LC-MS je potrebna kontrola nečistoč za validacijo lokalizacije, ločevanja, linearnega razpona in izkoristka. Brez nadzora validaciji metode manjka delček. Številne stranke nas prosijo, da najprej naredimo nekaj ključnih nečistoč, da vzpostavimo metodo, nato pa počasi nadomestimo ostalo.

Heterogena masna spektrometrija
Pri deklaraciji generičnega zdravila je potrebna celovita kvalitativna in kvantitativna analiza procesnih nečistoč in produktov razgradnje. Lokacijo, vsebnost in strukturo vsake nečistoče je treba potrditi s kontrolnim izdelkom. Videli smo, da je bila deklaracija o podatkih poslana, da bi se nadoknadila, devetkrat od desetih je nečistoč tega kosa ni razumel.

Študije stabilnosti
Pri dolgoročni-testih stabilnosti in pospešenih preskusih je treba ugotoviti, kateri produkti razgradnje prevladujejo in kakšen je trend vsebine. Z nadzorom nečistoč je mogoče natančno kvantificirati in spremljati. Ko je stranka preverjala stabilnost pripravka Ritaglutida, je bilo ugotovljeno, da vrh razgradnje raste zelo hitro v pospešenih pogojih, zato smo ga analizirali z MS in sintetizirali, da bi potrdili strukturo, nato pa nam je stranka z olajšanjem poročala o tem.

Testiranje sproščanja serije
Po komercializaciji je treba vsako serijo učinkovine ali formulacije testirati na zadevno snov. Kontrola nečistoč je bistveno orodje za testiranje sproščanja. Brez tega ne morete ugotoviti, kdo je vrh in koliko znaša.

Informacije o generičnih deklaracijah zdravil
Študije nečistoč so ključni del informacij o vložitvi. Zagotovite popolno analizo profila nečistoč in podatke o nadzoru, lahko znatno zmanjšate tveganje ocene vprašanja odškodnine. Strokovnjak, ki razglasi informacije, imate celoten nabor izdelkov za nadzor nečistoč, popolne podatke, veliko večjo enostavnost.

Primer 1: farmacevtsko podjetje, program generičnih zdravil ritaglutid
Razvijajo generično različico ritaglutida in so potrebovali celoten nabor kontrol nečistoč za validacijo metode. Zanje smo prilagodili 8 nečistoč: 3 manjkajoče peptide, 2 oksidirane nečistoče, 1 dimer, 2 produkta z maščobnimi kislinami. Čistost vsakega od njih je bila nad 95 % s podatki MS. Vodja projekta je dejal: "Teh nečistoč ne moremo kupiti in iskali smo več podjetij, ki tega ne zmorejo. Toda uspeli ste jih narediti vse in podatki so bili popolni, kar je bila velika pomoč." Kasneje je bila njihova validacija metode uspešno zaključena, dopolnjene pa so bile tudi informacije o deklaraciji.

Primer 2: CRO podjetje, profiliranje nečistoč
Lotili so se kakovostnega raziskovalnega projekta o retalutidu, ki je zahteval celovito analizo procesnih nečistoč. Poslali so nam vzorce surovih peptidov in izvedli smo analizo LC-MS, sklepali o možnih strukturah več neznanih nečistoč, jih nato ciljno sintetizirali in nato primerjali retencijske čase in masne spektre, da potrdimo tri nove nečistoče. Stranka je te podatke uporabila za izboljšanje spektra nečistoč in prestala sprejemljivost stranke. Kasneje so nas prosili, da naredimo nečistoče drugih vrst.

Primer 3: Študije stabilnosti, biotehnološko podjetje
Raziskovali so stabilnost ritaglutida in ugotovili, da se količina produkta razgradnje v pospešenih pogojih hitro povečuje, niso pa vedeli, kaj je to. Vzorec smo analizirali z LC-MS in domnevali, da gre za nečistoto deamidacije na določenem mestu Asn, nato pa jo ciljano sintetizirali in potrdili s primerjavo. Vzpostavili so test z uporabo te kontrole in natančno spremljali trend produkta razgradnje. Ob oddaji končnega poročila so bili podatki zelo solidni.

Retalutide je priljubljen izdelek, vendar so študije nečistoč občutljiva naloga. Manjkajoči peptidi, oksidirane nečistoče, izdelki za piling z maščobnimi kislinami zahtevajo posebne kontrole za lokalizacijo in kvantifikacijo. Če izvajate kakovostne raziskave ali generični razvoj ritaglutida in potrebujete nadzor nečistoč, se obrnite na nas. Opravili smo veliko dela, vemo, katere nečistoče so težke, in znamo jih izločiti.