Neoantigenski peptidi za imunoterapijo raka

Neoantigenski peptidi|Personalizirana sinteza neoantigenskega peptida|Prilagajanje dolgih/netopnih peptidov|Znanstveni-peptid

Potrebujete visokokakovostne neoantigenske peptide za osebno prilagojeno cepivo proti raku ali presejanje T-celic? Science-Peptide zagotavlja storitev sinteze neoantigen peptida, ki podpira dolge peptide, ognjevzdržna zaporedja, več-modifikacijo mest, visoko čistost, hitro dostavo, za pomoč pri raziskavah tumorske imunoterapije. Vabljeni, da nas kontaktirate.

Kot ve vsak, ki se ukvarja s tumorsko imunoterapijo, iskanje dobre tarče ni preprosto, sintetiziranje predvidenih neoantigenskih peptidov z visoko kakovostjo pa je prav tako izziv. Ti peptidi so pogosto dolgi, netopni in vsebujejo hidrofobne aminokisline, ki jih ni mogoče sintetizirati z običajnimi metodami sinteze. Na področju peptidov smo že 20 let in prejeli smo številna naročila za neoantigenske peptide in naleteli smo na najrazličnejše težave - nekatere je treba dostaviti pravočasno za pacientovo terapevtsko okno, nekaterih peptidov ni mogoče dobro premešati v vodi, nekateri pa imajo več mest mutacije, stisnjenih skupaj. Prav te izkušnje so nas pripeljale do izdelave sistema sinteze posebej za neoantigenske peptide in vsak korak, od zasnove poti do strategije čiščenja, je bil usmerjen v reševanje problemov.

Neoantigenski peptidi so preprosto edinstveni proteinski fragmenti, ki nastanejo zaradi mutacij v rakavih celicah. Te mutacije vključujejo točkaste mutacije, delecije insercij in genske fuzije, ki povzročijo zaporedja aminokislin, ki se razlikujejo od tistih v normalnih celicah. Ko molekule MHC te peptide predstavijo celični površini, imunski sistem prepozna, da je "to slabo" in napade.

V praksi se neoantigenski peptidi delijo na dve glavni kategoriji:

Dolgi peptidi (25-35 aa):inkapsulirajo mesto mutacije in okoliške sekvence, jih morajo dendritične celice pogoltniti, obdelati in nato predstaviti, kar se običajno uporablja v personaliziranih cepivih.

Kratki peptidi (8-11 aa):predvideni ali validirani epitopi za vezavo MHC, ki jih je mogoče uporabiti za neposredno stimulacijo celic T ali za tetramerizacijo.

Ne glede na to, ali gre za dolg ali kratek peptid, imajo sintetizatorji Neoantigen Peptide enake preglavice: zaporedje je hidrofobno, sintetizator ga zlahka »zadene«, izkoristek med čiščenjem je nizek in treba ga je dostaviti pravočasno za zdravljenje bolnika.

1. Specializirani za dolge in netopne peptide
Velik delež Neoantigen Peptidov, ki pridejo k nam, ima več kot 25 aminokislin. Običajne metode so pogosto neučinkovite pri obravnavanju teh peptidov. V preteklih letih smo ugotovili nekaj načinov za spopadanje z njimi:

• Fragmentacija: Dolgi peptid se razreže na več segmentov in sintetizira ločeno, vsak segment se najprej očisti, nato pa sestavi na smolo ali v tekoči fazi. Na ta način je zagotovljena kakovost vsakega segmenta, izkoristek in čistost končnega izdelka pa večja.
• Sinteza-s pomočjo mikrovalovne pečice: nekatere aminokisline nerade reagirajo z mikrovalovnim segrevanjem, učinkovitost reakcije se bo takoj povečala in stranskih-produktov je manj.
• Posebno čiščenje s topilom: nekateri peptidi niso topni v običajnih topilih, zato med čiščenjem dodamo DMSO, gvanidin hidroklorid in druga močna topila, da jih speremo s kolone, po liofilizaciji pa lahko še vedno ohranijo dobre lastnosti.

2. Ne manjka niti eno mutacijsko mesto
Bistvo Neoantigen Peptides je v tistih nekaj mutacijskih mestih, ki jih pri sintezi nikoli ne moremo zmotiti. Za neposredno uvedbo ne-naravnih aminokislin uporabljamo Fmoc trdno{1}}fazno sintezo in spremljamo podatke po vsakem koraku spajanja, da zagotovimo, da so aminokislinska zaporedja mest mutacije popolnoma enaka zasnovi.

3. Hitrost je težka
Terapevtsko okno za bolnike s tumorji je tako široko, da so peptidi brez pomena, če so pozni. Neoantigen Peptides smo dali zeleno luč:

• Kratki peptidi (<20 aa): 10 working days
• Dolgi peptidi (20-35 aa): 12-18 delovnih dni
• Pospešeno: 7 delovnih dni je po dogovoru, če se vam res mudi

Lani je bil kupec, ki je že organiziral svoje paciente in je čakal na peptide za izdelavo cepiva. Več naših sintetizatorjev je delalo v izmenah, da bi mu v dveh tednih dostavili vseh 30 peptidov.

4. Stroga merila čistosti in endotoksina
Ko nekaj uporabljate na ljudeh, si ne morete privoščiti kompromisa pri kakovosti. Ponujamo Neoantigen Peptides:

• Purity:>90%, >95%, >98 % Karkoli izberete
• Endotoksin:<2 EU/mg, or customized according to customer requirements
• Mikrobna meja: v skladu s farmakopejo
• Preostala topila: v skladu z ICH Q3C

Poročilo COA vsakega peptida spremljajo grafi HPLC in MS, podatke pa je mogoče izslediti, zato jih veliko strank neposredno vzame in vnese v deklaracijo.

5. Možno je tudi negovanje
Nekateri poskusi zahtevajo "ročaj" za neoantigenske peptide:

• Označevanje z biotinom: za tetramer MHC
• Fluorescentno označevanje (FITC, TAMRA, Cy5): za barvanje-skozi
• Pripajanje nosilnih proteinov (KLH, BSA): za imunizacijo živali
• Sprememba palmitinske kisline: izboljšanje cepiv pri iskanju bezgavk

Vse to lahko storimo skupaj, ne da bi morali iskati dva dobavitelja.

1. 20 let izkušenj in veliko težavnih težav
Na tem področju smo že 20 let in srečali smo se z vsemi vrstami težavnih peptidov in imamo način, kako se spopasti z dolgimi verigami, hidrofobnimi in ponavljajočimi se zaporedji, ki so skupni neoantigenskim peptidom, in ne bomo vam zlahka povedali, da tega ne zmoremo. Nekateri peptidi, za katere drugi mislijo, da jih ni mogoče izdelati, lahko pogosto najdemo izhod po nekaj dneh raziskovanja.

2. Sledenje tempu zdravljenja
Zdravljenje tumorja ne more čakati. Hitro-smo sledili programu neoantigenskih peptidov in dali prednost celotnemu procesu od ocene do dostave. Veliko strank nam je kasneje povedalo, da so nas izbrali, ker smo jim peptid dostavili v času, ki so ga potrebovali.

3. Kakovost je mogoče preveriti
Ne glede na to, ali gre za surovi peptid za znanstvene raziskave ali peptid visoke čistosti z nizko vsebnostjo endotoksina za predklinične raziskave, vse obravnavamo enako: ne manj kot en pregled kakovosti in ne manj kot eden od podatkov, ki jih je treba dati. Številne stranke neposredno kopirajo naše poročilo COA in ga vključijo v deklaracijske dokumente.

4. Od miligramov do gramov, brez zamenjave
Zgodnje odkrivanje je le nekaj miligramov, toksikološke študije obsegajo desetine gramov, klinična preskušanja obsegajo stotine gramov - od začetka do konca, prenesemo lahko vse. Ni vam treba zamenjati iste vrste in vam ni treba skrbeti za to.

5. Tvoje zaporedje, kot ga poznava samo ti in jaz
Novo zaporedje antigenov je temeljno sredstvo vsake stranke. Podpišemo pogodbo o zaupnosti, podatke o projektu pozna le nekaj ljudi v projektni skupini, podatkovni sistem pa je varen. V vseh teh letih ni bilo nikoli nobenega puščanja.

Podjetje za celično terapijo:imajo pacienta z napredovalim melanomom, ki čaka na personalizirano cepivo. 30 dolgi peptidi, 25-35 aminokislin, od katerih jih je 8 izjemno hidrofobnih, izkoristek čiščenja z običajnimi metodami pa je izjemno nizek. Za čiščenje peptidov smo uporabili kondenzacijo fragmentov in posebna topila ter vse dostavili kupcu v dveh tednih, endotoksin pa je bil nadzorovan pod 0,05 EU/mg. Kasneje, po pacientovem zdravljenju, je bilo več novih antigen-specifičnih klonov pomnoženih s T-celičnim testom in stranka nas je izrecno poklicala, da je povedala, da je "kakovost peptida zelo pomagala".

Vrhunski onkološki inštitut: they want to screen a batch of neoantigen-reactive TCRs and need 200 predicted peptides (9-11 aa). We synthesized all the peptides in three weeks using a high-throughput platform, and each peptide was >95% čist in potrjen z MS. Stranka je uporabila te peptide za izdelavo tetramerjev in pregledala več TCR z visoko-afiniteto, ki so zdaj v predkliničnem razvoju.

Ne glede na to, ali ste šele začeli s predkliničnimi raziskavami ali pa ste že v kliničnem preskušanju in potrebujete personaliziran peptid za cepivo, znanost-Peptide to zmore. Naša tehnična ekipa je pripravljena prisluhniti vašim potrebam.