Modifikacija peptida po meri|Kemijska modifikacija peptidov| Fluorescentno{0}}označen peptid, fosforiliran peptid, spenjani peptid|Znanstveni-peptid
Meta opis
Potrebujete peptide s posebnimi modifikacijami?Science-Storitev PeptideCustom Peptide Modification pokriva več kot 200 vrst modifikacij, kot so fluorescentno označeni, fosforilirani, glikozilirani, PEGilirani, spenjani peptidi itd. Z 20-letnimi izkušnjami lahko zagotovimo stabilno dostavo kompleksnih modifikacij. Prosimo, kontaktirajte nas.
Potrebujete modificiran peptid za vaše raziskave? Naredimo to.
Zakaj potrebujete prilagoditev peptida po meri?
Ko izvajamo raziskave, moramo peptidom - pogosto dodati nekaj »posebnih funkcij«, kot je pritrditev fluorescenčne skupine, da vidimo, kako deluje v celici, ali dodajanje fosforilne skupine, da posnemamo aktivacijsko stanje proteinov, ali izdelava spenjanega peptida, da postane struktura bolj stabilna in je encimi ne zlahka razgradijo. razgradijo encimi.
Te modifikacije se ne slišijo težko, a ko pride do njihove sintetizacije, se pojavi vprašanje: ali so mesta modifikacije pravilna? Ali je pridelek zadosten? Ali je čistost dovolj dobra? Se bo borilo več kombinacij sprememb?
Storitev Science-Peptide Custom Peptide Modification je specializirana za reševanje teh težav. Z 20-letnimi izkušnjami pri modificiranju peptidov in več kot 200 vrstami modifikacij lahko najdemo zanesljive sintetične poti za preprosto označevanje biotina ali zapletene kombinacije več-modifikacij.
Spodaj je nekaj vrst sprememb, ki jih podpiramo (delni seznam):
|
Vrste sprememb |
Pogoste spremembe |
Scenariji uporabe |
|
Fluorescentno označevanje |
FITC (fluorescein izotiocianat), FAM (fluorescein amidit), TAMRA (tetrametilrodamin), Cy3/Cy5, rodamin, serija Alexa Fluor |
Slikanje celic, pretočna citometrija, fluorescenčna polarizacija |
|
Označevanje afinitete |
Biotin, His{0}}oznaka (histidinska oznaka), Flag-oznaka, HA-oznaka (hemaglutininska oznaka) |
Čiščenje afinitete, testi pada-down in analiza SPR (površinska plazmonska resonanca) |
|
Spremembe stabilnosti |
PEGilacija (modifikacija s polietilen glikolom), modifikacija maščobnih kislin (npr. palmitinska kislina, miristinska kislina), modifikacija holesterola |
Podaljšanje-razpolovne dobe, izboljšana topnost, izboljšana prepustnost membrane |
|
Post{0}}posnemanje spreminjanja prevoda (posnemanje PTM) |
Fosforilacija (pSer: fosfoserin / pThr: fosfotreonin / pTyr: fosfotirozin), glikozilacija, acetilacija, metilacija |
Raziskave signalnih poti, identifikacija encimskega substrata, interakcija beljakovin-beljakovin |
|
Strukturne spremembe |
Amidacija, ciklizacija, spenjani peptid (stabiliziran peptid s kovalentno vezavo) |
Stabilizirana konformacija, povečana odpornost proti proteolizi, povečana aktivnost |
|
Vključitev nenaravnih aminokislin |
D-aminokisline, ne-naravne aminokisline, izotopsko označevanje (¹⁵N: dušik-15 / ¹³C: ogljik-13) |
Študije razmerja med strukturo in aktivnostjo (SAR), NMR (jedrska magnetna resonanca) strukturna analiza, testiranje presnovne stabilnosti |
|
Fotosenzitivne sonde |
Foto-zamreževalna skupina (Bpa: p-benzoil-L-fenilalanin), fotolabilna zaščitna skupina (Nvoc: nitroveratriloksikarbonil) |
Označevanje fotoafinitete, foto{0}}nadzorovano sproščanje, študije prostorsko-časovne specifičnosti |
|
Prekurzorji za radioaktivno označevanje |
DOTA (1,4,7,10-tetraazaciklododekan-1,4,7,10-tetraocetna kislina), NOTA (1,4,7-triazaciklononan-1,4,7-triocetna kislina) za kelacijo kovin |
PET/SPECT slikanje (pozitronska emisijska tomografija / enofotonska emisijska računalniška tomografija), razvoj radioterapevtskih zdravil |
Zakaj izbrati nas za prilagoditev peptidov po meri?
1. Več kot 200 vrst modifikacij, v bistvu imamo vse, kar vam pade na pamet.
Stranke pogosto pridejo k nam z literaturo in vprašajo: "Ali lahko naredite to modifikacijo?" Ogledamo si ga in največkrat je odgovor: "Uspeli smo in lahko naredimo še bolje." Ker smo v zadnjih 20 letih nabrali dovolj izkušenj in napak z oblogami, da vemo, kaj deluje in kaj ne.
2. Kompleksne modifikacijske kombinacije? Veliko smo jih razstavili.
Nekateri peptidi morajo imeti več modifikacij hkrati: N-terminalno fluorescentno označevanje, vmesno fosforilacijo, C-terminalno amidacijo. Tovrstna kombinacija je zelo zahtevna za strategijo sinteze in en napačen korak vodi v popoln neuspeh. Optimiziramo strategijo zaščite aminokislin in pogoje spajanja, da zagotovimo, da je vsaka sprememba na pravem mestu in ne moti druga druge.
Resnična zgodba: stranka je želela sintetizirati 25 peptid s 3 modifikacijami (fosforilacija + biotin + fluorescentno označevanje). Potem ko so vprašali več podjetij, so rekli, da tega ne morejo narediti, ali pa so rekli, da bo trajalo vsaj 6 mesecev. Po evalvaciji smo preoblikovali sintezno pot in v 6 tednih dostavili produkt s čistostjo več kot 92 %, naročnik pa nas je omenil celo v zahvali, ko je kasneje poslal članek.
3. Težke spremembe, v katerih smo boljši
Večkratne disulfidne vezi: do 4 pari za zagotovitev pravilne orientacije.
Spet peptid: vse verige ogljikovodikov so spete, izboljšajo spiralno stabilnost in prodiranje v celice.
Glikozilacija: O-konjugacija, N-konjugacija, lahko so tudi kompleksne sladkorne verige.
Hidrofobni dolgi peptid: sam hidrofobni peptid, ki ga je težje raztopiti z modifikacijo? Za to poskrbimo s posebnim sistemom topil.
4. Kontrola kakovosti ni formalnost, vsak peptid ima "ID izkaznico".
Nadzor kakovosti modificiranih peptidov je bolj težaven kot nadzor običajnih peptidov - ne samo, da moramo preveriti, ali je molekulska masa pravilna ali ne, ampak moramo tudi potrditi, ali je mesto modifikacije navedeno. Redno nudimo:
MS/MS sekundarna masna spektrometrija: neposreden dokaz, da je modifikacija pritrjena na želeni položaj.
HPLC analiza čistosti: čistost je takšna, kot je, brez laži.
Izbirni testi: vsebnost peptidov, endotoksin, vlaga, analiza aminokislinske sestave, dodajanje po potrebi.
5. Od miligramov do kilogramov, od raziskav in razvoja do proizvodnje
Modificiran peptid se dobro obnese v fazi presejanja, nato pa ga želite povečati za poskuse na živalih ali celo iti v kliniko? Brez težav. Na isti platformi lahko dokončamo povezavo od majhne količine do proizvodnje cGMP, način modifikacije postopka pomnoževanja pa ostane enak, kar prihrani težave pri prenosu procesa v poznejši fazi.
Kaj vam lahko pomaga doseči prilagoditev peptida po meri?
|
Navodila za raziskovanje |
Priporočene vrste sprememb |
Vrednost sprememb |
|
Cellično slikanje in sledenje |
FITC (fluorescein izotiocianat), TAMRA (tetrametilrodamin), Cy5, biotin |
Vizualizacija in lokalizacija, sledenje intracelularne porazdelitve peptidov |
|
Študije prenosa signala |
Fosforilacija (fosforilacija), acetilacija (acetilacija), metilacija (metilacija) |
Posnemanje post{0}}prevodnih stanj za preučevanje funkcionalnega vpliva sprememb |
|
Preverjanje zdravil |
Stapled peptid, PEGilacija, modifikacija maščobnih kislin |
Izboljšana stabilnost, prepustnost in aktivnost |
|
Encimska analiza |
Par za dušenje fluorescence (FRET peptid: Förster Resonance Energy Transfer peptide), fosforiliran peptid |
Spremljanje aktivnosti-encimov v realnem času, pregled zaviralcev |
|
Razvoj cepiva |
Glikozilacija (glikozilacija), lipidacija (sprememba lipidov) |
Izboljšana imunogenost, posnemanje naravnih antigenov |
|
Strukturna biologija |
Izotopsko označevanje (¹5N: dušik-15, ¹³C: ogljik-13), selenometionin (s selenom substituiran metionin) |
Študije NMR (jedrska magnetna resonanca) in rentgenske kristalografije |
|
Diagnostični reagenti |
Biotin, fluorescentno označevanje, DOTA (1,4,7,10-tetraazaciklododekan-1,4,7,10-tetraocetna kislina) |
Zajemne sonde, detekcijske sonde, slikovne sonde |
Dostava in kontrola kakovosti
Oblika izdelka:liofiliziran prašek, centrifugalne epruvete ali brizge.
Dokumentacija:Poročilo COA (s profilom HPLC in MS), poročilo o sintezi (neobvezno).
Dodatni testi:vsebnost peptidov, vlaga, endotoksin, mikrobiologija, aminokislinska sestava, validacija zaporedja - na zahtevo.
Zavedamo se, da kakovost modificiranega peptida neposredno določa uspeh ali neuspeh vaših nadaljnjih poskusov. Zato bomo vsak peptid, preden ga odpošljemo, večkrat preverili, da zagotovimo, da je mesto modifikacije pravilno, da je čistost v skladu s standardom in da je podatke mogoče izslediti.
Trije resnični primeri, poglejte, kako to uporabljajo
Primer 1: Povpraševanje vrhunskega centra za raka
Želijo peptid, pridobljen iz p53, z dvojno modifikacijo (fluorescentno označevanje + fosforilacija) za preučevanje interakcij proteinov. Težava je v tem, da je sam peptid po dodajanju obeh modifikacij hidrofoben in skoraj netopen. Ugotovili smo način, kako uvesti začasno solubilizacijsko oznako in jo nato odstraniti po sintezi ter končno dobili ciljni peptid. Naročnik ga je uporabil za izdelavo ključnih podatkov, članek pa je bil objavljen v Rakovi celici.
Primer 2: Evropsko biotehnološko podjetje
Razvijajo zdravila, povezana s- peptidi, in morajo strupene molekule pritrditi na določena mesta. Najprej smo sintetizirali modificiran peptid z ortogonalnimi zaščitnimi skupinami, naročnik pa je naknadno pritrditev opravil sam. Ker natančno nadzorujemo mesto modifikacije, imajo dobro selektivnost v povezavi in izkoristek je višji od pričakovanega.
Primer 3: Domača raziskovalna skupina
They need a batch of stapled peptides for antibacterial activity screening. The stapled peptides were difficult to synthesize and the yield was generally low. We optimized the introduction of olefinic amino acid and ring-closing conditions, and finally delivered a stapled peptide with purity >90 % in donos za 30 % višji od pričakovanega, pregled aktivnosti pa je bil uspešno zaključen.
Več kot samo modificirani peptidi, lahko naredimo veliko več
Pridobivanje visoko{0}}kakovostnega modificiranega peptida je pogosto le prvi korak v raziskavi. Sledi lahko več:
Potrdite dejavnost
Povečajte sintezo za študije na živalih
Razviti postopek za klinične študije
proizvodnja cGMP za klinična preskušanja
Znanost-Peptid je lahko z vami ves čas. Ne prodamo vam samo peptida, smo vaš tehnološki partner od odkritja do razvoja. Ko izberete našo prilagoditev peptida po meri, imate za seboj ekipo, ki razume kemijo in biologijo.
Pogovorite se o svojih potrebah?
Povejte nam podatke o svojem zaporedju (ali ciljnem ozadju), vrsto modifikacije, ki jo potrebujete, zahteve glede količine in čistosti. v 24 urah boste prejeli strokovno povratno informacijo o izvedljivosti in ponudbo.
